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水飛薊素是一種天然的黃酮木質(zhì)素類化合物,它源于菊科植物水飛薊。將水飛薊的果實經(jīng)過干燥,可以提取出來天然的活性物質(zhì),包括水飛薊賓、水飛薊寧、水飛薊亭等。水飛薊素是難溶于水的,但是可以輕松的溶解到丙酮、乙酸乙酯、甲酸乙醇等有機溶劑。水飛薊素對肝細胞膜有穩(wěn)定作用,避免某些對肝有毒性作用的物質(zhì)進入細胞內(nèi)部,同時它能夠幫助細胞結(jié)構和蛋白酶的大量合成,有助于肝細胞的修復和再生。研究水飛薊素,還是有比較大的科研價值的。
檢測樣品中的水飛薊素的方法,還是有很多種的。其中比較常見的有分光光度法、高效液相色譜(HPLC)法、氣相色譜(GC)法等。下面呢,簡單的做一個介紹。如果要做實驗,可以參考詳細的操作規(guī)程或步驟。
1.分光光度法
這種方法相對比較簡單,它是利用2,4-二硝基苯肼試劑和水飛薊素發(fā)生化學反應,生成有顏色的化合物。這個產(chǎn)物的顏色和水飛薊素的含量是呈一定的線性關系,為什么有這樣的結(jié)論呢,是通過標準品的檢測實驗獲得的,以有限次的實驗來推演理想化的線性。同時,以線性關系來反過來計算樣品中的化合物含量。打開分光光度計,選擇特定的波長,這個波長可以通過一系列的波長檢測同樣的標準品,獲得最大吸光度來確定。整個檢測過程,包括試劑和設備的準備,樣品的制備,標準曲線的制作,檢測結(jié)果的計算和分析等。
2.高效液相色譜(HPLC)法
在分析實驗室,HPLC是常用的一種檢測儀器。對樣品進行處理,在色譜柱中分離出水飛薊素,通過流動相逐步的展示出來,最后在檢測器的作用下獲得對應的信號,通過模擬信號轉(zhuǎn)化為檢測數(shù)據(jù)。要知道的是,設備是固定的,但也是靈活的。選擇理想的檢測條件,是對方法的驗證。如果方法不熟悉,肯定無法完成的。有了方法,也就是能夠熟悉檢測過程中的條件和要求,比如采用什么樣的色譜柱,流動相的配比,柱溫,進樣量,進樣速率,檢測器類型,檢測波長等。每個條件都可能影響到最終的檢測數(shù)據(jù)和結(jié)果,就要通過不同條件的對比,實現(xiàn)最優(yōu)化的組合。如果是一種新的方法,看起來是比較麻煩的。但對于成熟的方法,是直接拿來用的,能夠快速獲得高靈敏、高準確度的數(shù)據(jù)。通過對色譜峰高和峰面積的分析,計算出樣品中的水飛薊素含量。
除了以上的分光光度法和HPLC法,還有就是氣相色譜法。測定水飛薊提取物中的有機溶劑殘留量,如己烷、乙醇和丙酮。這種方法通過測定色譜峰面積來進行定量分析。